细胞培养需要提供合适的温度和气体环境，因此一般采用培养箱的形式来满足细胞培养的要求。
细胞培养的具体步骤：
1、细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的dmem*培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmx2min，弃上清液。
加入10ml dmem培养基清洗，弃上清液。加入10ml dmem*培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%co2的细胞培养箱中培养。
2、细胞传代
细胞密度达到80%~90%时．去培养基，10ml pbs清洗2次。加入3ml含0．25�ta的*，放人细胞培养箱3min。加人1ml dmem*培养基终止*消化，转移至15ml离心管。
加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。再加入10ml pbs（经高压灭菌，保存于40c），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%co2的细胞培养箱继续培养。
3、细胞冻存
细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml pbs清洗2次。加入3ml含0.25�ta的*，放人细胞培养箱3min。加入lmldmem*培养基终止*消化，转移至15ml离心管。加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。
加入lml冻存液（90%血清，10%dmso），放入冻存盒内（盒内有异丙醇，以保证温度降低的速度），立即放入一80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。
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细胞培养的具体步骤
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